생물학적 제품에서 재림 에이전트의 검출

생물 제품의 생산에 사용되는 종자, 세포 기질 및 원료의 재두질 물질 오염물에는 박테리아, 곰팡이, 마이코 플라스마, 마이코 박테리아 및 바이러스가 포함됩니다. 이러한 제제의 효과적인 제거 또는 제어는 비특이적이고 특정한 기술을 통해 달성된다.

• 비특이적 방법은 일반적으로 넓은 검출 범위를 제공하지만, 때때로 동물 및 배양 시험과 같은 잠재적인 숙주-관련 검출 문제 및 감도에 한계가 있다.

• 특정 방법은 유전자 서열에 대한 PCR과 같은 특정 병원체를 표적화합니다. PCR은 높은 감도를 갖지만, 이의 제한은 미지의 서열에 대한 프라이머를 설계할 수 없다는 것이다.

최대 생물 안정성을 보장하기 위해서는 원료 및 출발 재료의 적절한 소싱 및 품질 관리, 우수한 제조 관행 (GMP) 준수를 포함하는 포괄적 인 접근 방식을 따라야합니다. 원칙 (환경 및 인력 모니터링 및 프로세스 검증 포함) 및 검증을위한 엄격한 테스트. 아래의 방법은 일반적으로 재림 요원의 탐지에 사용됩니다.

1. Vivo 테스트에서:

1) 검사를 위해 배아 된 닭고기 달걀 또는 동물을 사용합니다.

2. Vitro 테스트에서:

1) 문화 방법:

• 다른 미디어 또는 한천 사용.

2) PCR 방법:

• 종 특이 적 바이러스 검출.

3) 생화학 방법:

• 역전사 효소에 대한 PERT와 같은 분석.

4) 유전자 서열 분석:

• 비특이적 바이러스 또는 박테리아 유전자 서열의 경우.

5) 감염 검사:

• 다양한 유형의 복제 유능한 바이러스에 대한 지표 세포 분석.

6) 전송 전자 현미경 (TEM):

• 형태 학적 관찰을 위해.

선행 제제 검출 방법은 생체처리 단계, 샘플 유형 및 표적 미생물에 따라 다양하다. 적절한 기기 및 시약을 사용하면 낮은 오염 수준에서도 신뢰할 수 있고 민감한 검출을 보장합니다. 고급 에이전트 검출을위한 보편적 인 방법은 없지만 아래 목록에서 올바른 기술을 선택하면 필요에 가장 적합한 방법을 찾을 수 있습니다.

1. 게놈 탐지:

• 고 처리량 시퀀싱을 활용하여 생물학적 제품에서 DNA를 종합적으로 서열화하고 이를 데이터베이스와 비교하여 잠재적 인 병원체 또는 기타 외인성 DNA를 식별합니다.

2. proteomic 탐지:

• 질량 분석법을 사용하여 생물학적 제품의 단백질을 분석하고 잠재적 인 외인성 단백질을 식별합니다.

3. 면역 학적 탐지:

• 생물학적 산물에서 특정 성분을 검출하기 위해 항체 또는 면역 반응 분석을 사용하여 잠재적 인 외인성 박테리아, 바이러스 또는 기타 유해 물질을 식별합니다.

4. 미생물학 탐지:

• 배양 방법을 사용하여 미생물을 분리하고 식별하고 잠재적 인 병원체를 감지합니다.

5. 분자 탐지:

• PCR을 사용하여 생물학적 생성물에서 DNA를 검출하고 표적 외인성 미생물을 확인한다.

PCR 기반 방법은 미생물 오염의 민감하고 신속한 검출 또는 정량화를 위한 가장 일반적인 분자 기반 기술이다. 특정 DNA 서열을 표적화함으로써 시험관 내에서 배양이 어렵거나 긴 배양 기간이 필요한 일부 특정 종의 검출을 가능하게합니다. qPCR에 의한 마이코 플라스마 종의 검출은 세포 및 유전자 치료 제조를 지원하는 빠른 QC 테스트에 필수적입니다.

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