이 키트는 P.pastoris 세포로부터 잔류 숙주 세포 단백질 (HCP) 을 검출하기 위해 이중 항체 샌드위치 기술을 사용한 고상 효소 결합 면역 흡착 분석 (ELISA) 을 기반으로합니다. P.pastoris HCP에 특이적인 양 폴리클론 항체를 분석에 사용하여 샘플 내의 임의의 남아있는 HCP를 포획하였다. 항체 커버리지는 현재의 주류 방법에 의해 평가된다. Anti-P.pastoris HCP 항체로 표지된 교정 표준 (또는 시험 샘플) 및 HRP (Horseradish Peroxidase) 를 동시에 친화도 정제 포획 항체로 코팅된 마이크로타이터 플레이트에 첨가하였다. 인큐베이션 및 세척. 그 후, TMB (3,3 ',5,5'-테트라메틸벤지딘) 기질을 반응에 첨가하고, HRP는 H2O2 에 의해 TMB의 산화를 촉매하여 청색 생성물 (655 nm에서 최대 흡수 피크) 을 생성하였다. 그 후, 정지 용액을 첨가하여 효소 반응을 종결시키고, 황색 생성물 (450 nm에서 최대 흡수 피크) 을 얻었다. 450 nm 파장에서의 흡광도 값은 교정 표준 및 샘플에서의 HCPs 농도와 양의 상관관계가 있었다. 샘플 내의 HCP의 농도는 용량-반응 곡선을 사용하여 계산될 수 있다.
| 구성 요소 | 배송 조건 | 단위 크기 | 탐지 방법 |
| P.pastoris교정 표준 | 2-8 ℃ | 96 개의 테스트 | 샌드위치 ELISA |
| 안티P.pastorisHCP 마이크로 티터 스트립 | |||
| 재구성 솔루션 | |||
| 희석제 | |||
| 세척 버퍼 집중 (10 ×) | |||
| Anti-P.pastoris:HRP (100 ×) | |||
| TMB 기판 | |||
| 중지 솔루션 | |||
| 밀봉 필름 |
| 선형 및 범위 | 2-200 ng/mL, R2> 0.990 |
| 정확도 | 복구 속도 = 97.7%-110.2% |
| LLOQ | 2 ng/mL |
| 로드 | 0.5 ng/mL |
| 반복성 | 6.6%-8.0% (CV≤ 20%) |
| 항체 범위 (IMBS-2D) | 72.1%-96.0% |
| 항체 범위 (IMBS-LC/MS) | 99.2% |
| 견고성 | 기기 적합성에 제한되지 않음 Thermo Multisskan FC 및 MD Spectra Max ABS |
센텍®잔여 Pichia pastoris DNA 정량화 키트
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