전통적인 물리적 분해 기술과 달리 pDNA 샘플의 HCP는 높은 알칼리성 용액에 노출되고 추출 과정에서 변성됩니다. 면역-분석에 의해 측정된 검출 결과에서 큰 차이를 초래한다. 이 키트는 E.coli K-12 균주로부터 잔류 숙주 세포 단백질 (HCP) 을 검출하기 위해 이중 항체 샌드위치 기술을 사용한 고상 효소 결합 면역 흡착 분석 (ELISA) 을 기반으로합니다. 알칼리 용해에 의해 제조된 E.coli (K-12 균주) HCP에 특이적인 양 폴리클론 항체를 분석에 사용하여 샘플 내의 임의의 남아있는 HCP를 포획하였다. 항체 커버리지는 현재의 주류 방법에 의해 평가된다. 교정 표준 및 시험 샘플 둘 다를 친화성 정제된 포획 항체로 코팅된 마이크로타이터 플레이트에 동시에 첨가하고, 이어서 인큐베이션 및 세척하였다. 바이오티닐화 항체를 마이크로타이터 플레이트에 첨가하여 HCP를 결합시킨 후, HRP (Horseradish Peroxidase) 로 표지된 스트렙타비딘과 반응시켰다. TMB (3,3 ',5,5'-테트라 메틸 벤지 딘) 기질을 반응에 첨가하고 HRP는 TMB의 산화를 촉매했습니다.H2오2청색 생성물 (655 nm에서 최대 흡수 피크) 을 제조한다. 그 후, 정지 용액을 첨가하여 효소 반응을 종결시키고, 황색 생성물 (450 nm에서 최대 흡수 피크) 을 얻었다. 450 nm 파장에서의 흡광도 값은 교정 표준 및 샘플에서의 HCPs 농도와 양의 상관관계가 있었다. 샘플 내의 HCP의 농도는 용량-반응 곡선을 사용하여 계산될 수 있다.
| 구성 요소 | 배송 조건 | 단위 크기 | 탐지 방법 |
| 대장균 HCP-AC 교정 표준 | 2-8 ℃ | 96 개의 테스트 | 샌드위치 ELISA |
| Anti-E.coli HCP-AC 마이크로 티터 스트립 | |||
| 재구성 솔루션 | |||
| 세척 버퍼 집중 (10 ×) | |||
| Anti-E.coli HCP-AC: Biotinylated Conjugate (20 ×) | |||
| Streptavidin-HRP (100 ×) | |||
| TMB 기판 | |||
| 중지 솔루션 | |||
| 밀봉 필름 |
| 선형 및 범위 | 3 - 729 ng/mL, R2> 0.990 |
| 정확도 | 복구 속도 = 87.1%-106.7% |
| LLOQ | 3 ng/mL |
| 로드 | 1.26 ng/mL |
| 정밀 | 4.4%-5.9% (CV≤ 15%) |
| 항체 범위 (IMBS-2D) | 70.0%-80.6% |
| 항체 범위 (IMBS-LC/MS) | 85.5% |
| 특이성 | CHO, Vero, HEK293T, Hansenula polymorpha HCP와의 교차 반응 없음 |
| 견고성 | 25 ± 3 ℃에서 인큐베이션, CV≤ 15% |
| Thermo Multiskan FC, Bio-Tek Synergy2 마이크로 플레이트 리더에 국한되지 않는 악기 적합성 |
센텍®대장균 (단백질 발현 변형) HCP ELISA 키트 (1 단계 ELISA)
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